IngredientesEl extracto dializable de leucocitos (DLE), también llamado "factor de transferencia de Lawrence", es una mezcla de péptidos de bajo peso molecular (menores a 10 kDa) que se liberan tras la disrupción de leucocitos de sangre periférica de sujetos humanos sanos. Este producto linfocitario se denomina a veces "extracto dializable de leucocitos" en la literatura científica debido a que es un extracto de glóbulos blancos sometido a diálisis para eliminar todas las moléculas mayores de aproximadamente 5,000 daltons.
Los extractos dializables de leucocitos son complejos formados por aproximadamente 200 sustancias de bajo peso molecular. Los DLE son complejos que consisten en un gran número de sustancias de bajo peso molecular, y estos extractos poseen propiedades inmunomoduladoras, atribuidas principalmente a pequeños péptidos con un peso molecular de 3.5–6.0 kDa llamados "factor de transferencia".
Las preparaciones de DLE se han derivado de varias fuentes biológicas:
Los factores de transferencia se administran mediante inyecciones o por vía oral. Existen varias preparaciones patentadas con nombre propio. Transferón es un DLE humano no específico fabricado por la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (ENCB), Instituto Politécnico Nacional (IPN), México, en instalaciones GMP, y está registrado por las autoridades sanitarias mexicanas como fármaco y se comercializa a nivel nacional. IMUNOR es un fármaco biológico oral que fue desarrollado, registrado y aprobado en 1997 en la República Checa y Eslovaquia. En ciertos países, como México, China, Cuba y la República Checa, los DLE están registrados como fármacos.
La unidad estándar de Transferón está bien definida: una unidad de Transferón es un vial estandarizado que contiene 2 mg de péptidos dializados por 5 mL. En un ensayo pediátrico de dermatitis atópica, la dosis de DLE oral utilizada fue DLE oral (2 mg/5 mL), administrado diariamente durante 5 días y luego cada 72 horas hasta completar un mes.
Brevemente, los leucocitos se separan por centrifugación del paquete globular anticoagulado de un donante inmunizado o no inmunizado; luego se separa el sobrenadante y se centrifuga de nuevo para eliminar el exceso de plasma, dejando un paquete de leucocitos. Los leucocitos se lavan repetidamente y se eluyen los glóbulos rojos y el plasma restantes. Se requieren aproximadamente 150 mL de sangre para obtener 0.5 cm³ de leucocitos concentrados. Después, los leucocitos se lisan con agua destilada o mediante 7–10 ciclos de congelación-descongelación en solución salina. El producto puede o no someterse a tratamiento con DNasa.
En 1949, Lawrence publicó la transferencia exitosa de sensibilidad cutánea tardía a la tuberculina (PPD) a pacientes PPD-negativos, y en 1952 transfirió exitosamente la sensibilidad a preparaciones parcialmente purificadas de la sustancia M estreptocócica mediante la administración de suspensiones de componentes leucocitarios liberados por lisis celular mediante congelación y descongelación repetidas o lisis con agua destilada.
En 1955, el Dr. H. Sherwood Lawrence definió el factor de transferencia, afirmando que la respuesta inmune mediada por células a antígenos (alérgenos) puede transferirse de forma pasiva mediante DLE de leucocitos humanos viables de un donante con inmunidad a un receptor ingenuo. Preparó un extracto intracelular de leucocitos circulantes de pacientes que habían estado expuestos a tuberculosis (TB) y luego inyectó el extracto leucocitario en pacientes voluntarios no expuestos. Mediante una prueba de hipersensibilidad de tipo tardío, Lawrence demostró que el sistema inmunológico de los pacientes no expuestos tratados con el extracto leucocitario podía reconocer la TB y responder a ella, como si ya la hubiera combatido. Por lo tanto, la respuesta inmune a un antígeno determinado podía "transferirse" de una persona a otra utilizando un extracto leucocitario.
El factor de transferencia fue descrito por Lawrence en 1955, quien encontró que los extractos dializables de leucocitos humanos viables pueden transferir pasivamente la hipersensibilidad de tipo tardío (DTH) a alérgenos de un donante inmune a un receptor ingenuo. El descubrimiento de que es posible transferir la inmunidad mediada por células a receptores ingenuos mediante derivados leucocitarios brindó una nueva oportunidad para la medicina.
El concepto inmunológico respaldado por abundante evidencia experimental desarrollado por Lawrence en 1949 fue que la inmunidad mediada por células (CMI) específica de antígeno, presente en el extracto dializable de leucocitos (DLE) de un individuo sensible a un antígeno, podía transferirse posteriormente a un individuo no sensible al mismo antígeno. Sus experimentos mostraron que transferir linfocitos de un donante PPD-positivo a un receptor sin exposición previa a la tuberculina resultaba en la conversión del receptor a positividad en la prueba cutánea. En una época en que la idea predominante era que todos los fenómenos inmunológicos estaban mediados por anticuerpos, la idea de que los linfocitos producían otras moléculas inmunológicas que podían transferir memoria inmune específica de un paciente a otro tuvo implicaciones radicales para el tratamiento de diversas enfermedades.
Sobre la base de este avance durante la década de 1950, Lawrence y sus colaboradores extendieron los hallazgos a otros antígenos, logrando la transferencia exitosa de hipersensibilidad tardía a coccidioidina e histoplasmina en sujetos humanos no inmunizados mediante extractos leucocitarios similares. Estos experimentos confirmaron la especificidad de la respuesta transferida, ya que los receptores desarrollaron reactividad en la prueba cutánea únicamente a los antígenos para los cuales se había preparado el extracto del donante, lo que subraya la naturaleza dirigida de la información inmune transmitida.
En 1992, Kirkpatrick describió y caracterizó el término "factor de transferencia" a nivel molecular. El concepto del DLE como terapéutico inmunomodulador se ha utilizado en medicina humana y veterinaria durante varias décadas, particularmente en países donde logró el estatus formal de registro como fármaco, incluidos México, China, Cuba y partes de Europa del Este.
Los extractos dializables de leucocitos son complejos formados por aproximadamente 200 sustancias de bajo peso molecular. Los DLE tienen propiedades inmunomoduladoras, que se deben a pequeños péptidos: el "factor de transferencia" (FT). El resto de los componentes de los extractos tienen diferentes propiedades bioquímicas e inmunológicas y contribuyen al efecto inmunomodulador que aporta el FT.
El factor de transferencia, el componente principal del DLE, tiene un peso molecular de 3.5–6.0 kDa. Consiste en pequeños péptidos y oligorribonucleótidos. El ribonucleótido está unido al extremo amino terminal del péptido. La actividad específica del FT se debe a los péptidos con un peso de 5.0 kDa.
Los DLE de origen humano y animal típicamente consisten en varios componentes biológicamente activos, que incluyen nucleótidos cíclicos, nicotinamida, bases púricas, histamina, ascorbatos, prostaglandinas, serotonina, aminoácidos, proteínas, entre otros.
Un estudio de Myles et al. identificó un DLE aislado de una línea celular establecida de linfocitos T CD8+ capaz de transferir inmunidad específica de antígeno. El DLE contiene una porción de la cadena beta del receptor de células T y factores adicionales de nucleótidos y proteínas que están siendo sometidos a análisis bioquímicos modernos más profundos.
Sinha et al. en 1988 identificaron dos péptidos inmunológicamente activos en el DLE humano, Tyr-Gly y Tyr-Gly-Gly, que a su vez forman parte de lo que se denominó "IM-REGe1": una fracción de bajo peso molecular de dializados de leucocitos humanos con potencial actividad inmunoestimulante.
"Transferón Oral" es un producto derivado de péptidos con propiedades inmunomoduladoras obtenido de la lisis y diálisis de la capa leucocitaria humana ("buffy coat"); su principio activo farmacéutico, conocido genéricamente como Extracto Dializable de Leucocitos, es una mezcla de poblaciones de péptidos con proporciones reproducibles entre lotes. El análisis proteómico indica que un producto de FT es un conjunto complejo de oligo- y polipéptidos constituido por 163 péptidos diferentes que potencialmente pueden actuar sobre múltiples mecanismos de las vías del sistema inmunológico.
El DLE se deriva de diferentes subpoblaciones de leucocitos, cada una con funciones y moléculas distintas; por lo tanto, el DLE tiene muchos efectos biológicos sobre el sistema inmunológico, no todos relacionados con la transferencia de inmunidad.
La complejidad del DLE ha impedido una caracterización extensa de sus componentes, sustancias activas y actividades biológicas. Hasta donde saben los investigadores, hasta 2000 solo existía un informe sobre la identificación de secuencias de péptidos en extractos dializables derivados de células de mamíferos (ratón y bovino) (Kirkpatrick, 2000). En ese trabajo, Kirkpatrick obtuvo la secuencia de péptidos conservados mediante secuenciación por degradación de Edman. Sin embargo, esas secuencias de péptidos no se han encontrado hasta la fecha en ningún proteoma conocido.
Según diferentes estudios, el principal mecanismo de acción del FT se encuentra a nivel de la inmunidad mediada por células. Estudios tempranos encontraron que el FT podía transmitir la capacidad de expresar reacciones de hipersensibilidad tardía (DHR), así como inmunidad mediada por células, de un individuo o donante previamente sensibilizado con un antígeno a un receptor no inmune o no sensibilizado.
Estudios in vitro encontraron que las células T de individuos sanos podían producir TNF-α, IL-12 e IL-10 tras la estimulación con DLE, identificando a los monocitos como la principal población celular que producía TNF-α tras la estimulación con DLE y mostrando la activación directa de monocitos a través de TLR2. Con base en estos y otros resultados de varios investigadores, se asume que el DLE posee oligorribonucleopéptidos y fragmentos del receptor de células T; estos péptidos inmunomoduladores estimulan el sistema inmunológico innato al activar a los monocitos para producir IL-6 e IL-8, pero también el sistema inmunológico adaptativo al potenciar la liberación de IL-2, IFN-γ y TNF-α de las células Th1.
El mecanismo de acción propuesto de Transferón es la inducción de una respuesta inmunorreguladora Th1. El aumento de la expresión de Th1 a su vez reprime la producción de Th2 y sus citocinas como IL-4, IL-5, IL-6 e IL-13.
Los extractos dializables de leucocitos activan TLR-2 en los monocitos. Este hallazgo posiciona al DLE como un ligando para receptores de reconocimiento de patrones del sistema inmunológico innato, lo que podría explicar su amplia actividad inmunoestimulante independiente de la especificidad antigénica.
Las investigaciones han explorado si el DLE modula la producción de citocinas proinflamatorias en leucocitos activados por componentes de la pared celular bacteriana como el lipopolisacárido (LPS), el ácido lipoteicoico (LTA) y el peptidoglicano (PGN), así como el efecto del DLE en células endoteliales estimuladas con LPS, y si el efecto regulador del DLE sobre los mediadores inflamatorios se relaciona con la modulación de los receptores tipo Toll (TLR), NF-κB y las vías de señalización del AMPc.
En modelos in vitro, "Transferón Oral" aumenta la expresión de CD80/CD86 y los niveles de IL-6 en células similares a macrófagos THP-1 estimuladas con LPS, mientras que induce la diferenciación de células NK productoras de IFN-γ CD56+CD16+CD11c+ a partir de células progenitoras CD34+ obtenidas de cordón umbilical humano.
Investigaciones in vitro han demostrado que el FT facilita la capacidad de los linfocitos para destruir células cancerosas. El DLE bovino puede causar fragmentación del ADN en células de cáncer de mama MCF-7 y puede inducir el efecto citotóxico y la supresión de algunas proteínas que influyen en la apoptosis (TP53, Bag-1, c-Myc, Bax, Bcl-2 y Bad) a nivel de la expresión de ARNm en células de cáncer de mama MCF-7.
Un dato favorable es que el FT carece de células viables que desempeñen un papel en las reacciones de injerto contra huésped, no es inmunogénico y no contiene antígenos de histocompatibilidad.
Esta es una de las aplicaciones clínicas más estudiadas del DLE. Los ensayos clínicos han mostrado que los DLE mitigan la duración de la fase aguda, la frecuencia de recurrencias y el dolor en pacientes con herpes zóster mejor que el aciclovir. Estos efectos se correlacionan con niveles elevados de IFN-γ y recuentos de células CD4+.
En investigaciones con modelos animales utilizadas como ensayo de control de calidad: los 27 lotes de Transferón probados mejoraron la supervivencia de ratones infectados con VHS-1, en los que la supervivencia promedio aumentó de 20.9% en ratones control a 59.6% en ratones tratados con Transferón. La actividad de Transferón se correlacionó con niveles séricos elevados de IFN-γ y concentraciones reducidas de IL-6 y TNF-α.
Transferón, la versión parenteral de "Transferón Oral", aumenta los niveles de IFN-γ en suero y favorece la evolución clínica en pacientes con infección por herpes zóster cuando se administra por vía subcutánea.
Fuerza de la evidencia: Existe cierta evidencia clínica en humanos para el herpes zóster (tasa de recurrencia, gravedad, duración), y datos más sustanciales en modelos animales para el VHS-1. Los ensayos en humanos citados son generalmente pequeños y no todos son controlados con placebo; por lo tanto, la evidencia es preliminar a moderada.
Los estudios sobre el factor de transferencia celular han involucrado principalmente modelos animales y pequeños ensayos clínicos en humanos. Estos estudios han demostrado evidencia preliminar de modulación inmune, así como algunos beneficios clínicos en un puñado de enfermedades, pero los estudios no han sido evaluados más allá de las fuentes primarias y los ensayos deben considerarse únicamente preclínicos. Un ensayo que investigó su capacidad para inmunizar a niños con leucemia contra la culebrilla mostró resultados prometedores en un pequeño número de pacientes, pero representa solo uno de dos estudios controlados con placebo.
Fuerza de la evidencia: Muy limitada — un solo ensayo pequeño controlado con placebo; no es suficiente para extraer conclusiones firmes.
Se llevó a cabo un ensayo clínico con seis años de seguimiento utilizando una preparación de DLE en pacientes asintomáticos con VIH. El veintiocho por ciento de los individuos no tratados mostró progresión de la enfermedad, mientras que solo el 7% de los pacientes tratados con DLE progresó a SIDA. Estos resultados indican que el DLE retrasa la progresión de la enfermedad. Sin embargo, la base molecular que respalda este efecto permaneció desconocida.
Fuerza de la evidencia: Este estudio abierto de seguimiento de seis años es intrigante, pero carece del rigor de un ensayo controlado aleatorizado (ECA). La evidencia es preliminar; ningún ECA grande y bien controlado ha confirmado estos resultados.
Las investigaciones han revisado el efecto y las desventajas del DLE en forma de Extractos Dializables de Leucocitos o Factores de Transferencia durante y después de la quimioterapia, la radioterapia, las interacciones farmacológicas y la respuesta al cáncer en diferentes tipos de cáncer, como el cáncer de mama metastásico, el glioma, el cáncer de próstata, el osteosarcoma y otros.
Osteosarcoma: Al probar una preparación de FT (Transferón) como adyuvante de la quimioterapia en pacientes con osteosarcoma en etapas III y IV, Juárez registró un aumento en el número de células CD3+ CD8+, CD16+ y CD56+ en la sangre de los pacientes. El tratamiento de pacientes con osteosarcoma con factor de transferencia derivado de donantes seleccionados aumentó la citotoxicidad mediada por células. Parece que el tratamiento con FT puede proporcionar profilaxis contra las metástasis cuando se administra a pacientes sin metástasis clínicamente evidentes en el momento de la extirpación quirúrgica del tumor primario.
Cáncer de Próstata: Pizza et al. realizaron una investigación de seguimiento que abarcó de 1 a 9 años. Cincuenta pacientes con cáncer de próstata que no respondían a la terapia convencional fueron tratados con FT. En el 44% de ellos se observó un efecto beneficioso (mayores tasas de supervivencia). En modelos murinos, "Transferón Oral" (1–25 μg/kg) reduce el crecimiento tumoral y la metástasis en un modelo murino de cáncer de próstata.
Cáncer de Pulmón: Los pacientes con cáncer de pulmón que usaron FT demostraron una mayor tasa de supervivencia. (Esta cita refleja datos reportados de una pequeña serie clínica; faltan datos de ensayos controlados.)
Cáncer de Mama: El DLE aumenta el porcentaje de células tumorales apoptóticas y el porcentaje de tejido tumoral que expresa citocinas Th1. Este estudio mostró los beneficios de combinar el FT con quimioterapia debido al efecto sinérgico, lo que sugiere que las dosis de quimioterapia pueden disminuirse manteniendo el efecto del tratamiento.
Fuerza de la evidencia: Las aplicaciones oncológicas se basan casi exclusivamente en modelos animales, estudios in vitro y reportes clínicos pequeños, no controlados o no aleatorizados. No se han publicado grandes ensayos clínicos controlados aleatorizados que establezcan la eficacia en ningún cáncer específico. Estos datos son exploratorios y únicamente generadores de hipótesis.
Dado que el mecanismo de acción propuesto del FT es el aumento de la expresión de citocinas del fenotipo Th1, y debido a que estas pueden inhibir la expresión de citocinas Th2 o del fenotipo atópico, sería de esperar que el DLE resultara útil para tratar enfermedades alérgicas.
Para investigar la eficacia y seguridad de los Extractos Dializados de Leucocitos (DLE) como terapia adyuvante para la dermatitis atópica (DA) moderada, se realizó un ensayo clínico doble ciego, controlado con placebo, aleatorizado, de un solo centro. Se inscribieron cincuenta y ocho pacientes pediátricos con DA moderada y se aleatorizaron en dos grupos: tratamiento convencional más DLE oral (2 mg/5 mL), diariamente durante 5 días y luego cada 72 horas hasta completar un mes; o tratamiento convencional más placebo con la misma dosis y administración. Se observó una mejoría clínica significativa desde el día 14 tanto con el tratamiento convencional como con el tratamiento convencional más terapia con DLE, pero no se encontraron diferencias significativas en las principales medidas de resultado clínico entre los grupos.
Fuerza de la evidencia: Un pequeño ECA doble ciego en dermatitis atópica pediátrica no encontró superioridad significativa al agregar DLE sobre la terapia convencional sola. La evidencia es débil y no respalda específicamente el uso de DLE para esta indicación según el ensayo controlado disponible.
El tratamiento con FT conduce a la restauración de la expresión del patrón de citocinas Th1, mientras que el aumento de la hipersensibilidad de tipo tardío conduce a la inhibición de la proliferación bacteriana y a la supervivencia de los animales, como se muestra en modelos murinos de tuberculosis. Los tratamientos con preparaciones de FT en pacientes con lepra se realizaron durante un período bastante largo (más de 40 años). Se logró una mejoría en la condición de los pacientes, pero los resultados no fueron convincentes. Se obtuvieron y probaron preparaciones de FT contra la candidiasis mucocutánea crónica, la coccidioidomicosis y la queratitis fúngica.
Fuerza de la evidencia: Débil a preliminar; principalmente series clínicas animales y pequeñas no controladas. Los datos específicos sobre la lepra fueron inconclusos.
El FT en casos de Hepatitis C estimuló Th1, lo que ayuda en la eliminación de partículas virales. La evidencia clínica en humanos sigue limitada a pequeños reportes no aleatorizados.
Fuerza de la evidencia: Muy preliminar; existen datos controlados inadecuados.
Un estudio murino de 2025 exploró la combinación del DLE humano con el fármaco antiparasitario albendazol: el HLE combinado con albendazol mejoró la eliminación larvaria y suprimió la expresión del gen 14-3-3 en las larvas en un modelo murino de infección por Mesocestoides vogae. Esto representa una exploración preclínica actual, pero aún no tiene traducción a humanos.
Los factores de transferencia se administran mediante inyecciones o por vía oral. Las dosis específicas reportadas en la literatura científica incluyen:
El evento adverso (EA) más común observado con el DLE (Transferón) fue el dolor de cabeza en el 15.7% de los pacientes, seguido de erupción cutánea en el 11.4%, aumento de la sintomatología relacionada con la enfermedad en el 10%, rinorrea en el 7.1%, tos en el 5.7% y fatiga en el 5.7% de los pacientes. El 63% de la presentación de eventos adversos ocurrió del día 1 al día 4 del tratamiento con Transferón, y el tiempo medio de resolución de los eventos adversos fue de 14 días. En 23 casos, la terapia se suspendió debido a eventos adversos, y no se observaron eventos adversos graves en este estudio. Transferón indujo una baja frecuencia de eventos adversos no graves durante el tratamiento adyuvante.
Los efectos secundarios incluyen fiebre e inflamación y dolor en el sitio de la inyección.
El factor de transferencia derivado de humanos parece ser seguro para su uso durante hasta dos años, y el factor de transferencia celular derivado de bovinos (de fuentes sanguíneas), hasta por tres meses. Se ha demostrado que la administración oral a largo plazo de factores de transferencia derivados del calostro es segura.
La forma inyectable del factor de transferencia de humanos se ha evaluado en niños cuando se administra durante hasta 6 años. El factor de transferencia de vacas se ha evaluado en niños cuando se administra por vía oral durante hasta 6 meses.
Los factores de transferencia están contraindicados para mujeres embarazadas o en período de lactancia.
Cuando el factor de transferencia derivado de humanos y de bovinos se genera a partir de células sanguíneas, conlleva el riesgo potencial de enfermedades transmitidas por la sangre, como el VIH/SIDA y la Hepatitis C.
Se ha planteado la preocupación sobre la posibilidad de contraer la encefalopatía espongiforme bovina (enfermedad de las vacas locas) u otras enfermedades a partir de productos derivados de sangre animal. Existe cierta preocupación sobre la posibilidad de contraer la "enfermedad de las vacas locas" (encefalitis espongiforme bovina, EEB) u otras enfermedades a partir de productos que provienen de animales. La "enfermedad de las vacas locas" no se ha transmitido mediante el factor de transferencia, pero probablemente sea prudente evitar productos animales de países donde se haya detectado la enfermedad de las vacas locas.
No se observó ningún efecto mutagénico en un análisis de producto, y la DL₅₀ fue de 5,000 mg/kg de peso corporal, lo que representa un producto seguro para su uso por vía oral, con beneficios potenciales para el sistema inmunológico.
Es necesaria una caracterización fisicoquímica exhaustiva del DLE debido a su composición altamente compleja, y el desarrollo de múltiples métodos analíticos es esencial para la especificación cualitativa de los productos farmacéuticos de DLE, que consisten en una mezcla compleja de péptidos y nucleótidos. La estandarización sigue siendo un desafío continuo entre los diferentes fabricantes y preparaciones. Su complejidad ha impedido una caracterización extensa de sus componentes, sustancias activas y actividades biológicas.
A pesar de un pequeño grado de éxitos, el factor de transferencia generado a partir de sangre humana (derivado de humanos), bazo de vaca (derivado de bovinos) o bazo de ratón (derivado de murinos) no se encuentra en uso clínico rutinario en la actualidad. En cambio, los factores de transferencia derivados del calostro de vaca y/o de yemas de huevo de gallina son los que se utilizan predominantemente en contextos comerciales hoy en día.
Condiciones de salud que extracto de leucocitos dializables puede ayudar a apoyar.
Sistemas corporales que extracto de leucocitos dializables puede ayudar a apoyar.
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